Mario, der Bruder von Luigi, ist ein italienischer Klempner. Er gilt als die bekannteste Videospielfigur der Welt und ist außerdem das Maskottchen von Nintendo. Seine typischen Sprüche sind „Mamma mia“ und „It's-a-me, Mario“, und sein Charakter ist hilfsbereit und abenteuerlustig. 1983 wurde Mario erstmals ein titelgebender Protagonist des Spiels „Mario Bros.“. Anschließend sind weiterhin sehr viele weitere Mario-spiele für die unterschiedlichen Nintendo Konsolen erschienen.
Luigi ist der jüngere Bruder von Mario. Wie auch sein Bruder ist er Klempner, jedoch ist er größer und schlanker als dieser. Oft kann er in Spielen höher und weiter springen als Mario. Sein erstes titelgebendes Spiel war Luigi’s Mansion, darauf folgten weitere Spiele mit Luigi als Hauptcharakter.
Wario, Marios Cousin, galt zuerst als geldgieriger Gegner von Mario. Dadurch entstand auch sein Name, er kommt aus einer Mischung des Namen „Mario“ und des japanischen Adjektivs „warui“ für böse, es bedeutet also „böser Mario“. Sein Aussehen basiert ebenfalls auf das von Mario, nur dass Wario muskulöser und dicker ist. Er kam in dem Spiel „Wario Land – Super Mario Land 3“ erstmals zum Einsatz, anschließend folgten Spiele der WarioWare-Reihe, wo er auftrat. Sein Charakter ist egoistisch und hinterlistig, allerdings ist er in manchen Spielen auch ein Freund von Mario und co.
Waluigi wurde erfunden, um Luigi ebenfalls ein eigenen persönlichen Gegner zu geben, er ist sozusagen der „böse Luigi“. Er ist der Cousin von Mario und Luigi, und ein Freund/der Bruder von Wario. Sein Zeichen ist ein umgedrehtes „L“, was das Gegenstück zu Luigi ist, dessen Zeichen das „L“ ist. Er hat einen ähnlichen Charakter wie Wario.
Prinzessin Peach ist bekannt, immer wieder in verschiedenen Spielen von Marios Gegner Bowser entführt zu werden. Mario hat dann die Aufgabe, seine Freundin jedes Mal wieder zu retten, die Grundlage vieler Mario-spiele. Ihre Persönlichkeit ist immer höflich und freundlich.
Prinzessin Daisy ist die Cousine von Prinzessin Peach und ist die Freundin von Luigi. Ihre Beziehung ähnelt der Beziehung von Mario und Peach. Daisys Charakter ist energisch und sehr fröhlich. Sie kommt in vielen Spielen als Nebenrolle oder spielbarer Charakter vor.
Yoshi ist ein grüner Dinosaurier und ein Freund von Mario. Er ist bekannt für seine lange Zunge, mit der er Gegner und andere Sachen verschlucken kann. Manchmal verleiht ihm dies spezielle Fähigkeiten. Yoshi gilt als freundlich und hilfsbereit, und in manchen Spielen ist er verschiedenfarbig, zum Beispiel im Mehrspielermodus.

Toad ist sehr klein und ist einem Fliegenpilz nachempfunden. Erist sehr freundlich und gilt als sehr abenteuerlustig, und wurde bekannt durch das Spiel Super Mario Bros., wo nach jedem Endgegner, bis auf den letzten, mit den Worten „Thank you Mario! But our princess is in another castle!“ auftritt.

Es gibt Toad auch in verschiedenen Farben, diese Toads kommen oft als Hinweise oder Nebenfiguren in Spielen wie zb. Super Mario 64 oder Super Mario 3d Land vor. Sie stehen auch oft in Spielen am Rand, wie zum Beispiel im Schloss oder in einem Pilz-haus.

Toadette ist allgemein der weibliche Toad, und wird auch als Freundin von Toad angesehen. Sie hat ein paar Nebenauftritte in diversen Spielen.

Donkey Kong (kurz DK) war einer der ersten Videospielcharaktere von Nintendo. In seinem titelgebenden Spiel Donkey Kong hieß Mario noch Jumpman. Er hatte eine eigene Spielserie und tritt in vielen Nebenspielen auf. In den neueren Spielen trägt er eine rote Krawatte auf dem sich sein Logo befindet.
Diddy Kong ist Donkey Kongs bester Freund. Er hilft Donkey Kong bei sehr vielen Abenteuern und ist auch als Nebencharakter in verschiedenen Spielen vorhanden.